Nanophotometer®可以測量的樣品種類，是用(yòng)戶關心的問題。特别是經常測量的核酸類樣品，我們一般用(yòng)dsDNA的濃度作(zuò)爲示例，以展示設備的濃度測量範圍，而您可能(néng)會(huì)問，RNA可以測量嗎？引物可以測量嗎？短序列能(néng)測嗎？DNA納米材料能(néng)測嗎？

超微量分管光度計(jì)并不直接測量濃度，而是通過光學檢測器測量樣品的吸光值，根據朗伯-比爾定律計(jì)算(suàn)濃度的。因此，符合該定律的所有樣品均可以被測量。以NP80機型爲例，檢測器的檢測範圍爲0.02A-330A（已換算(suàn)爲10mm下(xià)吸光值），波長範圍爲200-900nm，那麽原則上(shàng)樣品的吸光值和(hé)吸收波長隻要落在這(zhè)個範圍内，都可以被測量，可獲得定量或相對(duì)定量的濃度值和(hé)其他(tā)信息。

核酸中的嘌呤和(hé)嘧啶堿基有共轭雙鍵，具有吸收紫外(wài)光的性質，其至大(dà)吸收波長在250nm-270nm之間。堿基與戊糖、磷酸形成核苷酸後，其至大(dà)吸收峰不會(huì)改變，至大(dà)吸收波長約在260nm，吸收低(dī)峰在230nm。目前通行的标準，在波長260nm處，1單位OD值的光密度相當于雙鏈DNA（dsDNA）濃度爲50ng/μl、單鏈DNA（ssDNA）濃度爲37ng/μl、RNA濃度爲40ng/μl、單鏈寡核苷酸爲33ng/μl（常規值）。

也(yě)就是說，設備測量的吸光值，乘以這(zhè)些(xiē)系數（1/ε），就可以得到(dào)對(duì)應樣品的濃度值。任何種類的核酸樣品都是可以測量的，關鍵是在軟件中正确選擇樣品種類。Nanophotometer®測量界面可選擇多種核酸樣品類型，在報(bào)告中也(yě)會(huì)有對(duì)應的方法學及消光系數顯示。也(yě)可以輸入核苷酸的序列來(lái)确定樣品具體的消光系數（可支持70萬個以上(shàng)堿基序列，但(dàn)通常用(yòng)于寡核苷酸具體消光系數的确認）。

如果錯誤地選擇了(le)樣品類型，但(dàn)已完成了(le)測量，也(yě)有兩種方法可以補救：

方法一：不擡起樣品蓋，重新選擇正确的樣品類型，再次測量。Implen的樣品壓縮法支持這(zhè)種操作(zuò)，而液柱拉伸法不建議(yì)一滴樣品的多次測量。

方法二：在結果中查看(kàn)吸光值數據，手動乘以消光系數，計(jì)算(suàn)濃度。

例如：測量RNA樣品時(shí)，選擇了(le)dsDNA樣品，測得濃度爲200ng/μl，則樣品實際濃度應爲160ng/μl（200/50×40ng/μl）（暫不考慮很(hěn)小(xiǎo)的背景校正）。

對(duì)于蛋白(bái)質應用(yòng)，原理(lǐ)相同，根據0.02-330A的吸光值檢測範圍，結合蛋白(bái)質的消光系數ε，可确定任意蛋白(bái)質樣品的濃度檢測範圍。如BSA（消光系數0.667）檢測範圍爲0.03-478mg/ml，則某消光系數爲1.33的單抗樣品檢測範圍即爲0.015-239mg/ml。實際的線性範圍需要根據樣品情況具體測試。 

Nanophotmeter®基于紫外(wài)-可見吸收光譜的測量，不但(dàn)可以勝任各種核酸和(hé)蛋白(bái)質的定量，還具備全光譜測量的優異性能(néng)，Implen在分析化學領域也(yě)具有廣泛的應用(yòng)。樣品壓縮法的一大(dà)特點就是良好(hǎo)的樣品兼容性，推出的4096陣列CMOS檢測器也(yě)使測量的可靠性進一步提高(gāo)。對(duì)于多樣化的樣本測量，Implen可以充分滿足用(yòng)戶的期望。

轉載：江西立康公衆号 鏈接：https://mp.weixin.qq.com/s/rFeCiftwwKivc3_HSeq9ig