超微量分光光度計(jì)作(zuò)爲常用(yòng)的核酸、蛋白(bái)等生物大(dà)分子的定量和(hé)表征工(gōng)具，廣泛應用(yòng)于生命科學和(hé)生物制藥等領域，用(yòng)戶僅需微量樣品即可獲得濃度及吸光度結果。然而在日常使用(yòng)中，一些(xiē)用(yòng)戶會(huì)對(duì)測量結果有疑慮，尤其是當測量結果與預估的結果出現(xiàn)較大(dà)差異，或與使用(yòng)其他(tā)方法的定量結果有差異時(shí)，用(yòng)戶往往會(huì)懷疑設備出現(xiàn)問題或故障。

實際上(shàng)，作(zuò)爲精密的分析儀器，設備出現(xiàn)問題的幾率并不高(gāo)，尤其是當設備正常使用(yòng)和(hé)日常維護時(shí)，更多的問題可能(néng)由外(wài)部因素導緻，如樣品的均質、顆粒物或氣泡幹擾等。本文(wén)提所列的方法可幫助您判定設備的狀态，以便您放(fàng)心的進行測量工(gōng)作(zuò)。

标準品測量

常用(yòng)的标準品可使用(yòng)BSA或核酸标準品，可從(cóng)各試劑廠(chǎng)家購買，或使用(yòng)如BCA定量試劑盒，QUBIT核酸定量試劑盒中的标準品。請(qǐng)注意标準品要在效期之内，且保存得當（通常低(dī)溫）。也(yě)可以使用(yòng)設備廠(chǎng)家提供的小(xiǎo)分子化合物标準品，如Implen提供的PHP标準品。标準品是有等級區(qū)分的，通常附帶有檢定證書的标準品，标稱濃度會(huì)更準确。

    特别指出的是，使用(yòng)未知(zhī)濃度的樣品，來(lái)評估不同設備的測量結果，并以其中一台作(zuò)爲基準，判定另外(wài)一台的準确性，是完全錯誤的。

重複性測量

在缺乏标準品，或标準品由于保存不當狀态已存疑時(shí)，可使用(yòng)未知(zhī)濃度樣品做重複性測試。這(zhè)可以判斷設備的穩定性，以排除一些(xiē)潛在問題，如樣品台損壞、樣品的非均質，成分幹擾等。雖然不能(néng)确定準确性誤差，但(dàn)重複性很(hěn)好(hǎo)的設備，很(hěn)大(dà)幾率是沒有大(dà)問題的。當然，這(zhè)需要結合您的允差要求，綜合考量。

梯度稀釋測量

使用(yòng)已知(zhī)濃度或未知(zhī)濃度的樣品，均可進行梯度稀釋測量，以驗證設備的線性穩定性。使用(yòng)設備的标準曲線功能(néng)可便捷地完成此項測試，并給出線性回歸。當梯度稀釋的R2趨近于1，設備的線性完全可滿足廣泛的動态範圍内的測量要求，同時(shí)也(yě)可反映設備的良好(hǎo)狀态。需要注意的是，梯度稀釋時(shí)要選擇定期校準過的，準确性好(hǎo)的移液器，且正确操作(zuò)。

基線穩定性測量

光源和(hé)CCD檢測器，作(zuò)爲設備的核心組件，其穩定性對(duì)于設備而言是非常重要的，而基線測量可以很(hěn)好(hǎo)地反映這(zhè)些(xiē)部件的狀态。使用(yòng)水(shuǐ)（或空(kōng)氣）作(zuò)爲空(kōng)白(bái)，并且用(yòng)水(shuǐ)（或空(kōng)氣）作(zuò)爲樣品，做多次重複測量，如果吸光值的漂移很(hěn)小(xiǎo)，通常可反映設備的光學系統組件狀态正常。

光譜曲線

正常的核酸和(hé)蛋白(bái)質樣品，或者其他(tā)化合物樣品，都具有典型的吸收曲線。異常的曲線往往說明(míng)樣品的問題，或設備光路系統可能(néng)存在的問題。光譜曲線可作(zuò)爲測量結果可靠性的參考，且多數設備可根據曲線給出樣品潛在問題的警告。

 通過以上(shàng)測試方法，可以評估設備的狀态和(hé)試驗數據的可靠性。實際工(gōng)作(zuò)中，由于設備本身原因導緻的測量不準确畢竟是占少數的。規範操作(zuò)，正确使用(yòng)應是用(yòng)戶更應關切的核心。後續，我們将爲您解讀關于超微量測量樣品時(shí)的一些(xiē)常見誤區(qū)，希望您持續關注，更加惬意地使用(yòng)您的Nanophotometer®。