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賽默飛(fēi)世爾推出甲型H1N1流感病毒RNA提取的方法,通過 KingFisher系列磁珠提取純化技術,結合一些(xiē)磁珠試劑盒,如Macherey-Nagel公司的NucleoMag Virus kit,Invitek公司的InviMag Virus RNA kit,Ambion(ABI)MagMAX Viral kit,Roche公司Magna Pure RNA or total NA kit,chemagen公司的Chemagic Viral Kit等,可在15-30分鐘(zhōng)内提取96個樣品的病毒RNA,提取的高(gāo)質量RNA可直接進行real-time RT-PCR,确診樣品是否含有甲型H1N1流感病毒。世界衛生組織(WHO)于2009年4月28日公布的CDC qRT-PCR檢測方法中磁珠法純化病毒RNA作(zuò)爲甲型H1N1流感病毒診斷實驗步驟中核酸提取的方法之一。
賽默飛(fēi)世爾的KingFisher系列磁珠分離技術已經通過美(měi)國國家獸醫(yī)服務實驗室(NVSL)認證可用(yòng)于AI/ND病毒,并成功用(yòng)于禽流感病毒,新城(chéng)疫病毒,牛腹瀉病毒等傳染性疾病的檢測和(hé)診斷,總體時(shí)間約4個小(xiǎo)時(shí)。詳細情況請(qǐng)參考賽默飛(fēi)世爾公司參與推出禽流感高(gāo)通量檢測新技術。該檢測技術同樣适用(yòng)于甲型H1N1流感病毒的高(gāo)通量檢測。
KingFisher可以從(cóng)生物體液和(hé)無細胞樣品中,如血清、血漿、口腔拭子和(hé)細胞培養液中,提取病毒RNA。從(cóng)無細胞樣品中分離純化RNA比從(cóng)組織和(hé)培養細胞中分離純化RNA更具挑戰性。這(zhè)是因爲低(dī)的病毒滴度、大(dà)的操作(zuò)體積和(hé)樣品的複雜(zá)性,且操作(zuò)步驟須适合實時(shí)定量RT-PCR。使用(yòng)KingFisher自(zì)動化磁珠提取方法可滿足上(shàng)述各項要求,賽默飛(fēi)世爾公司的KingFisher磁珠提取技術,不需有機溶劑或RNA沉澱步驟,消除了(le)基于濾膜的方法經常碰到(dào)的問題,如濾膜堵塞、大(dà)的洗脫體積和(hé)不穩定的産率,同時(shí)保了(le)95%以上(shàng)的磁珠回收率,保痕量樣品RNA的充分提取。而結合後續的實時(shí)定量RT-PCR,可儀檢測到(dào)低(dī)至10拷貝的病毒RNA,很(hěn)大(dà)增強了(le)甲型H1N1流感病毒檢測的靈敏度。
基于KingFisher磁珠純化系統的甲型H1N1流感病毒RNA提取的方法優勢如下(xià):
很(hěn)高(gāo)靈敏度:可從(cóng)100-400ul樣品中分離到(dào)少至10拷貝的病毒RNA
檢測速度快(kuài):對(duì)于96個樣品,整個磁珠提取純化病毒RNA過程爲15-30分鐘(zhōng),整個甲型流感檢測過程不過4個小(xiǎo)時(shí)
衡量樣品的檢測:真實反映痕量病毒樣品的含量,避免假陰性線性純化效率低(dī)至50轉錄子
經美(měi)國國家獸醫(yī)服務實驗室(NVSL)認證可用(yòng)于AI/ND病毒
此外(wài),賽默飛(fēi)世爾科技還提供與甲型H1N1流感病毒RNA檢測相關的整體解決方案,包括從(cóng)取樣,傳送,分離,病理(lǐ)學确認,分子生物學鑒定,樣品保存。從(cóng)耗材到(dào)儀器包括:低(dī)溫保存系統:液氮罐和(hé)低(dī)溫冰箱,取樣傳送的耗材:Nunc/Nalgene的取樣瓶,試管,帶濾芯的TIP頭,各種移液器等,Nanopure UF和(hé)Nanopure UV/UF純水(shuǐ)儀提供無核酸酶的純水(shuǐ),具備生物認證的Pico&Fresco17/Micro17&17R微量離心機等,如需要更多信息,歡迎訪問www.thermo.com.cn或緻電800-810-5118。
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